康老师

蛋白表达诱导条件对时间和温度的影响研究

2022-12-05 03:07:01
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一般建议先进行小试,来确定最合适的条件。

在诱导时间上并不总是时间越长越好。尤其是对于宿主有毒性的蛋白。在诱导期间,我们需要每隔几个小时就进行取样检查目的蛋白的表达。

通常情况下,溶解度在较低的温度下可以得到增强。由于我们需要得到可溶性蛋白,以便进行下一步的纯化,所以可以尝试在30℃,25℃和18℃下进行诱导。

不同的蛋白进行诱导表达需要的时间和温度,还需要根据具体情况来进行确定。

蛋白表达诱导的时间和温度

IPTG浓度时0.1mM诱导时间一般24个小时如果是冷休克载体的话是15度诱导,不同的宿主和载体可能略有差异可以以上面数据为基点,做个一定范围的探索。

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网友评论
显示评论内容(3) 收起评论内容
  1. 2023-10-24 13:31依琪[北京市网友]202.63.180.92
    搞蛋白表达的同学都懂,时间和温度的调优是个耗时耗力的过程。不过一旦成功了就很有成就感!
    顶0踩0
  2. 2023-07-08 18:03却殷[黑龙江省网友]202.45.1.66
    时间和温度的选择要根据具体的蛋白来定,每个蛋白可能最适合的条件都不一样。
    顶3踩0
  3. 2023-03-22 22:35彩云之南[吉林省网友]122.102.88.61
    这个话题我之前也碰到过,温度控制真的很重要,对实验结果影响很大。
    顶8踩0
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